1.Вибір правильної клітинної лінії
Вибираючи відповідну лінію клітин для свого експерименту, враховуйте такі критерії:
a. Види: Клітинні лінії, відмінні від людини та приматів, зазвичай мають менше обмежень щодо біобезпеки, але врешті ваш експеримент визначить, чи використовувати культуру певного виду.
b.Особливості: Яка мета вашого експерименту?Наприклад, клітинні лінії, отримані з печінки та нирок, можуть бути більш придатними для тестування на токсичність.
c. Обмежена або безперервна: хоча вибір з обмеженої клітинної лінії може надати вам більше можливостей для вираження правильної функції, безперервні клітинні лінії, як правило, легше клонувати та підтримувати.
d. Нормальні або трансформовані: трансформовані клітинні лінії зазвичай мають вищу швидкість росту та вищу ефективність посіву, є безперервними та потребують менше сироватки в культуральному середовищі, але їхній фенотип зазнав постійних змін через генетичну трансформацію.
e. Умови та характеристики росту: які ваші вимоги до швидкості росту, щільності насичення, ефективності клонування та здатності до росту в суспензії?Наприклад, щоб експресувати рекомбінантні білки з високим виходом, вам може знадобитися вибрати клітинні лінії, які мають швидкі темпи росту та здатність рости в суспензії.
f.Інші критерії: якщо ви використовуєте обмежену лінію клітин, чи достатньо запасів?Чи повністю охарактеризована лінія клітин, чи вам потрібно перевірити це самостійно?Якщо ви використовуєте аномальну клітинну лінію, чи існує еквівалентна нормальна клітинна лінія, яку можна використовувати як контроль?Чи стабільна лінія клітин?Якщо ні, то наскільки легко його клонувати та створити достатньо замороженого матеріалу для експерименту?
2.Отримати клітинні лінії
Ви можете створити власну культуру з первинних клітин або придбати відомі культури клітин у комерційних чи некомерційних постачальників (наприклад, банків клітин).Постачальники з довірою надають високоякісні клітинні лінії, які ретельно перевірені на цілісність і гарантують, що культура вільна від забруднень.Ми рекомендуємо не позичати культури з інших лабораторій, тому що вони мають високий ризик зараження культури клітин.Незалежно від його джерела, будь ласка, переконайтеся, що всі нові клітинні лінії були перевірені на зараження мікоплазмою, перш ніж почати його використовувати.
Час публікації: 01.02.2023