У процесі побудови клітинної лінії випадкова інтеграція відноситься до випадкової вставки екзогенних генів у довільні локуси геному господаря.Проте випадкова інтеграція має обмеження та недоліки, і цільова інтеграція поступово витісняє її завдяки своїм перевагам.У цій статті буде детально пояснено, чому цільова інтеграція замінює випадкову інтеграцію, і обговорюватиметься її важливість у побудові клітинних ліній.
I. Гнучкість і точність
Цільова інтеграція забезпечує вищу гнучкість і точність порівняно з випадковою інтеграцією.Вибираючи конкретні сайти інтеграції, екзогенні гени можна точно вставити в бажані ділянки геному господаря.Це дозволяє уникнути непотрібних мутацій і втручання генів, роблячи побудову клітинної лінії більш контрольованою та передбачуваною.Навпаки, випадкова інтеграція може призвести до неефективних вставок, мультикопій або нестабільних копій, які обмежують подальшу оптимізацію та модифікацію клітинних ліній.
II.Безпека та стабільність
Цілеспрямована інтеграція забезпечує вищу безпеку та стабільність у побудові клітинної лінії.Вибір безпечних місць та інших консервативних інтеграційних локусів мінімізує потенційний вплив на геном господаря.Отже, вставка екзогенних генів не призводить до аномальної експресії або генетичних мутацій у господаря, забезпечуючи стабільність і біобезпеку клітинної лінії.Навпаки, випадкова інтеграція може спричинити несподівані перегрупування генів, втрату генів або аномальну клітинну поведінку, знижуючи рівень успіху та стабільність побудови клітинної лінії.
III.Керованість і передбачуваність
Цільова інтеграція забезпечує більшу керованість і передбачуваність.За допомогою точного контролю сайтів інтеграції та кількості екзогенних генів можна досягти специфічних генетичних модифікацій у клітинних лініях.Це допомагає зменшити нерелевантні варіації та генетичне втручання, роблячи побудову клітинної лінії більш контрольованою, повторюваною та масштабованою.З іншого боку, результати випадкової інтеграції неможливо точно контролювати, що призводить до різноманітності клітин і невизначеності, обмежуючи спрямовану модифікацію та розвиток конкретних функцій.
IV.Ефективність і економічність
Цільова інтеграція демонструє вищу ефективність і економічність.Оскільки цільова інтеграція вставляється безпосередньо в потрібні локуси, це дозволяє уникнути трудомісткого та трудомісткого процесу скринінгу великої кількості клітинних клонів, що містять цільовий ген.Крім того, цілеспрямована інтеграція може зменшити потребу у виборі тиску, наприклад, антибіотиків, тим самим зменшуючи вартість і час, необхідний для побудови клітинної лінії.Навпаки, випадкова інтеграція часто вимагає скринінгу великої кількості клонів, і складніше виявити мутації деградації або інактивації в конкретних генах, що призводить до нижчої ефективності та вищих витрат.
Підсумовуючи, цільова інтеграція поступово замінює випадкову інтеграцію в будівництві клітинних ліній завдяки своїй вищій гнучкості, точності, безпеці, стабільності, керованості, передбачуваності, ефективності та економічній ефективності.З безперервним прогресом і розвитком технологій цілеспрямована інтеграція ще більше розширить свої застосування в конструюванні клітинних ліній і генній інженерії, забезпечуючи більше можливостей і можливостей для біотехнологічних досліджень і промислового виробництва.
Час публікації: 26 червня 2023 р