1. Що таке культура клітин?
Клітинна культура означає видалення клітин у тварин або рослин і подальше їх вирощування у сприятливому штучному середовищі.Клітини можуть бути взяті безпосередньо з тканини та розщеплені ферментативними або механічними засобами перед культивуванням, або вони можуть бути отримані з встановлених клітинних ліній або клітинних ліній.
2. Що таке первинна культура?
Первинна культура відноситься до стадії культури після того, як клітини відокремлюються від тканини і проліферують у відповідних умовах, поки вони не займуть усі доступні субстрати (тобто досягнуть злиття).На цьому етапі клітини необхідно пересіяти, перемістивши їх у новий контейнер зі свіжим середовищем для росту, щоб забезпечити більше місця для подальшого росту.
2.1 Клітинна лінія
Після першої субкультури первинна культура називається клітинною лінією або субклоном.Клітинні лінії, отримані з первинних культур, мають обмежену тривалість життя (тобто вони обмежені; див. нижче), і коли вони проходять, домінують клітини з найвищою здатністю до росту, що призводить до певного ступеня генотипу в популяції, що відповідає фенотипу.
2.2 Штам клітин
Якщо субпопуляцію клітинної лінії позитивно відібрати з культури шляхом клонування або іншим методом, клітинна лінія стане штамом клітин.Штами клітин зазвичай отримують додаткові генетичні зміни після початку батьківської лінії.
3. Обмежені та безперервні клітинні лінії
Нормальні клітини зазвичай діляться лише обмежену кількість разів, перш ніж втрачати здатність до проліферації.Це генетично обумовлена подія, яка називається старінням;ці клітинні лінії називають кінцевими клітинними лініями.Однак деякі клітинні лінії стають безсмертними через процес, який називається трансформацією, який може відбуватися спонтанно або може бути індукований хімічними речовинами чи вірусами.Коли кінцева клітинна лінія зазнає трансформації та отримує здатність ділитися необмежено довго, вона стає безперервною клітинною лінією.
4. Стан культури
Умови культивування кожного типу клітин дуже різні, але штучне середовище для культивування клітин завжди складається з відповідного контейнера, який містить наступне:
4.1 Субстрат або культуральне середовище, що забезпечує необхідні поживні речовини (амінокислоти, вуглеводи, вітаміни, мінерали)
4.2 Фактори росту
4.3 Гормони
4.4 Гази (O2, CO2)
4.5 Регульоване фізико-хімічне середовище (pH, осмотичний тиск, температура)
Більшість клітин залежать від закріплення і повинні культивуватися на твердому або напівтвердому субстраті (адгезивна або одношарова культура), тоді як інші клітини можуть рости плаваючи в середовищі (суспензійна культура).
5.Кріоконсервація
Якщо в субкультурі є надлишок клітин, їх слід обробити відповідним захисним засобом (наприклад, ДМСО або гліцерин) і зберігати при температурі нижче -130 °C (кріоконсервація), доки вони не знадобляться.Для отримання додаткової інформації про субкультуру та кріоконсервацію клітин.
6.Морфологія клітин в культурі
Клітини в культурі можна розділити на три основні категорії на основі їх форми та зовнішнього вигляду (тобто морфології).
6.1 Клітини фібробластів біполярні або мультиполярні, мають витягнуту форму та ростуть прикріпленими до субстрату.
6.2 Епітеліоподібні клітини є полігональними, мають регулярніший розмір і прикріплені до матриксу окремими листами.
6.3 Лімфобластоподібні клітини є сферичними і зазвичай ростуть у суспензії, не прикріплюючись до поверхні.
7. Застосування культури клітин
Культура клітин є одним із основних інструментів, що використовуються в клітинній та молекулярній біології.Він забезпечує чудову модельну систему для вивчення нормальної фізіології та біохімії клітин (таких як метаболічні дослідження, старіння), впливу ліків і токсичних сполук на клітини, а також мутагенезу та канцерогенних ефектів.Він також використовується для скринінгу ліків, розробки та великомасштабного виробництва біологічних сполук (таких як вакцини, терапевтичні білки).Основною перевагою використання культури клітин для будь-якого з цих застосувань є постійність і відтворюваність результатів, які можна отримати за допомогою партії клонованих клітин.
Час публікації: 03 червня 2019 р